更新時間:2024-08-07
Click Chemistry Tools生產的鏈霉親和素磁珠具有市場上ZUI高的生物素結合能力之一(每毫克> 12 nmol生物素)。 更高的結合力可減少固定生物素化樣品所需的珠子質量,并降低非特異性結合的背景噪音,從而產生更好的信號并降低凈成本。 珠的直徑為1.0 µm,每毫克珠至少結合12 nmol的游離生物素。 磁珠還具有出色的磁性,可使用各種磁力架快速有效地捕獲。
鏈親和素磁珠streptavidin magnetic beads
Click Chemistry Tools manufactures Streptavidin Magnetic Beads with one of the highest biotin binding capacities on the market (>12 nmol of biotin per mg). Higher binding translates into reduced bead mass required to immobilize a biotinylated sample and lower background noise from nonspecific binding, resulting in better signals and lower net costs. The beads are 1.0 µm in diameter and bind at least 12 nmol of free biotin per milligram of beads. The beads also have excellent magnetic properties for rapid and efficient capture using a variety of magnetic stands.
Click Chemistry Tools生產的鏈霉親和素磁珠具有市場上ZUI高的生物素結合能力之一(每毫克> 12 nmol生物素)。 更高的結合力可減少固定生物素化樣品所需的珠子質量,并降低非特異性結合的背景噪音,從而產生更好的信號并降低凈成本。 珠的直徑為1.0 µm,每毫克珠至少結合12 nmol的游離生物素。 磁珠還具有出色的磁性,可使用各種磁力架快速有效地捕獲。
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Click chemistry tools是一家專業生產熒光疊氮化物探針,代謝標記試劑;化學輔助試劑,生物素/鏈霉抗生物素蛋白的富集試劑,其產品遠銷國內外,歡迎咨詢。
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鏈親和素磁珠streptavidin magnetic beads
Alkyne-PEG4-Acid | TA102-100 | 100 mg | $195 | click chemistry tools |
Cy5 NHS Ester | 1076-1 | 1 mg | $105 | click chemistry tools |
Cy7 NHS Ester | 1115-1 | 1 mg | $105 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 405 Labeling Kit | 1313 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 546 Labeling Kit | 1316 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 647 Labeling Kit | 1320 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
產品介紹:clickchemistrytools
點擊化學(Click chemistry)—蛋白質組學研究和新藥研發的理想技術。美國一家小眾里生物公司,國內通常稱呼為CCT,生產有濃縮介質,代謝標記試劑,生物素標記試劑,熒光染料以及交聯劑.
“點擊化學"( “click chemistry")是2001年美國諾貝爾化學獎獲得者、史格堡研究院(Skaggs institute)化學生物研究所的研究員貝瑞夏普利斯(K. Barry Sharpless)發展出一種新技術,其所具有的高效和高控制性,在化學合成領域掀起了一場風暴,成為目前醫藥領域吸引人的發展方向,被業界認為是未來加快新藥研發有效的技術之一。“點擊化學"的基本思想就是利用碳-雜原子成鍵反應快速實現分子多樣性,一般由疊氮化物(azide)和炔烴(alkyne)作用形共價鍵,具有高效穩定,高特異性等優點。反應不受PH影響,能在常溫條件下的水中進行,甚至能在活細胞中進行
原理介紹:
1.鏈霉/親和素
親和素主要包括卵白親和素、鏈親和素、卵黃親和素及類親和素等。后兩種因其特異性親和力低,研究不多,前兩種目前已深入研究并得到廣泛應用。
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,pI 10~10.5;在pH9~13緩沖液中性質均穩定,耐熱并耐多種蛋白水解酶的作用。天然親和素為堿性蛋白,由4個相同的亞單位構成4聚體;每個親和素亞單位通過其結構中的色氨酸殘基與生物素中的Ureido環(I環)結合。因此,1個親和素分子存在4個與生物素分子結合位點,其結合常數(Ka)高 達1015mol/L。
鏈霉親和素(SA)是與親和素(A)有類似生物學特性的一種蛋白質。是由Streptomyces avidin菌在培養過程中分泌的一種蛋白質產物,SA也可通過基因工程手段生產。SA分子量為65000,由4條序列相同的肽鏈構成,每條SA肽鏈可以結合1個生物素分子。因此與A一樣,每個SA分子也具有4個可與生物素分子結合位點,其結合常數與A相同為1015mol/L。約為抗原抗體間ka(105~1011 mol/L)的1萬倍以上。
SA與A的ka雖然相同,但在實際應用中其檢測靈敏度明顯優于A,其原因是SA為 略偏酸性的蛋白。SA的每條肽鏈含159個氨基酸殘基,其中賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸的含量比一般親合素少,反之含酸性氨基酸較多,其等點為6.0,較A(pI=10)為低,同時在結構中SA不含任何糖基,而A含糖可高達10%。A的高pI及高含糖結構導致在聚苯乙烯板和硝酸纖維素膜上或與組織細胞DNA結合時,易產生一定程度的非特異性結合,造成較高的顯色背景,而SA較A在應用中明顯克服了這一缺點。
SA的活性可達18u,較A高(15u);與A一樣,每個SA分子也具有4個可與生物素分子結合位點,故其效應相同。
2.生物素
生物素(Biotin)為B族維生素之一,又稱維生素H、維生素B7、輔酶R(Coenzyme R)等。是20世紀30年代在研究酵母生長因子和根瘤菌的生長與呼吸促進因子時,從肝中發現的一種可以防治由于喂食生雞蛋蛋白誘導的大鼠脫毛和皮膚損傷的因子。生物素是水溶性維生素B群成員。
生物素(biotin,B)廣泛分布于動、植物組織中,常從含量較高的卵黃和肝組織中提取,分子量244.biotin31Da.生物素分子有兩個環狀結構(如圖),其中Ⅰ環為咪唑酮環,是與親和素結合的主要部位;II環為噻吩環,C2上有一戊酸側鏈,其末端羧基是結合抗體和其他生物大分子的結構,經化學修飾后,生物素可成為帶有多種活性基團的衍生物--活化生物素。活化生物素可以在蛋白質交聯劑的介導下,與已知的幾乎所有生物大分子偶聯,包括蛋白質,核酸,多糖,脂類等。
3.鏈親和素-生物素系統
生物素-親和素系統(Biotin-Avidin-System,BAS)是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。隨著各種生物素衍生物的問世,BAS很快被廣泛應用于醫學各領域。近年大量研究證實,生物素-親和素系統幾乎可與目前研究成功的各種標記物結合。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應,使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。它已成為目前廣泛用于微量抗原、抗體定性、定量檢測及定位觀察研究的新技術。
原理示意圖
BAS在實際應用中所具有的巨大*性,主要表現在以下幾個方面。
生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。
親和素與生物素間的結合具有*的親和力,其反應呈高度專一性。因此,BAS的多層次放大作用在提高靈敏度的同時,并不增加非特異性干擾。而且,BAS結合特性不會因反應試劑的高度稀釋而受影響,使其在實際應用中可大限度地降低反應試劑的非特異作用。
親和素結合生物素的親和常數可為抗原-抗體反應的百萬倍,二者結合形成復合物的解離常數很小,呈不可逆反應性;而且酸、堿、變性劑、蛋白溶解酶以及有機溶劑均不影響其結合。因此,BAS在實際應用中,產物的穩定性高,從而可降低操作誤差,提高測定的精確度。
生物素-親和素系統的多功能性還能提供一套統一的研究方法。例如對于某待測分子,已經得到了對于該分子的生物素標記抗原,那么配合結合親和素的膠體金可以在電鏡下觀測,配合結合熒光標記的親和素可以使用流式細胞儀篩選,配合連接到酶的親和素可以進行ELISA等免疫組化實驗。
BAS可依據具體實驗方法要求制成多種通用性試劑(如生物素化第二抗體等)適用于不同的反應體系,而且都可高度稀釋,用量很少,實驗成本低;尤其是BAS與成本高昂的抗原特異性抗體偶聯使用,可使后者的用量大幅度減少,節約實驗費用.此外,由于生物素與親和素的結合具高速、高效的特性,盡管BAS的反應層次較多,但所需的溫育時間不長,實驗往往只需數小時即可完成